Како је извршена ПЦР анализа: опис поступка

Share Tweet Pin it

Ланчана реакција полимеразе позната је 30 година. Широко се користи у многим областима, од археологије до генетике.

То је ПЦР метода која помаже успостављању очинства, али најчешће се користи за идентификацију различитих заразних болести у људском тијелу.

Како је извршена анализа ПЦР-а, а шта је то? Покушаћемо детаљно одговорити на ова питања.

ПЦР анализа - шта је то?

Полимерасе цхаин реацтион (ПЦР) - прецизности молекуларна генетичка дијагностици која омогућава особи да идентификује различите заразних и наследне болести, и акутни и хроничне фазе и много пре него што се болест може манифестовати.

ПЦР метода је апсолутно специфична и правилно изведена не може дати лажно позитиван резултат. То јест, ако нема инфекције, анализа никада неће показати да јесте. Због тога сада врло често за изјаве о дијагнози поред тога анализирају ПТСР да дефинишу оригинатор и његову или његову природу.

Полимеразну ланчану реакцију (ПЦР) 1983. развила је Цари Муиллис (САД), за коју је 1993. добио Нобелову награду за хемију.

Која је предност ове методе?

Дијагностицирање овим методом омогућава проналазак патогена директно у гену, који се налази у материјалима који се истражују. Ово је најтачнија анализа сексуалних инфекција, скривених инфекција, различитих полно преносивих болести.

Разлике у ПЦР дијагностици из других метода лабораторијских истраживања су следеће:

  • метода је усмерена на откривање самог патогена;
  • дијагноза по ПЦР методи је разноврстан: да открије патогене неколико;
  • довољан је само један биолошки пример пацијента;
  • метода има високу осјетљивост и није праћена другим унакрсним реакцијама.

Поред тога, предност ПЦР дијагностике је у томе што је сваки биолошки материјал пацијента погодан за анализу: крв, секреције из гениталија, урина, семена.

Које инфекције могу открити протителеса на ПЦР?

У телу може бити великог броја патогена инфекција, то укључује и "скривено", које се дуго не манифестује на било који начин.

Анализа размаза на ПЦР открива такве инфекције:

Тестни материјал за ПЦР је обично спутум, пљувачка, урин, крв. Прије анализе, пажљиво се припремите за њега, након што сте добили прелиминарне консултације са доктором.

Крв за ПЦР се обично даје на празан желудац. Добри резултати показују анализу када се материјал за студију узима из цервикалног канала или уретре. У овом случају, најбоље је провести ПЦР дијагностику најкасније у року од једног дана након сексуалног односа.

Врсте ПЦР

ПЦР се користи у многим областима за анализу и научне експерименте. Постоје различите методе анализе:

  1. ПЦР (РТ-ПЦР) за повратну трансакцију - користи се за појачавање, изолацију или идентификацију познатог секвенца из библиотеке РНК.
  2. Инвертед ПЦР (инверзни ПЦР (енглески)) - се користи када је позната само мала област унутар жељене секвенце. Ова метода је нарочито корисна када је потребно одредити суседне секвенце након уношења ДНК у геном.
  3. Уграђени ПЦР (Уграђени ПЦР (енглески)) - користи се за смањење броја реакцијских нуспроизвода. Користе се два пара прајмера и изведу се две узастопне реакције.
  4. Асиметрични ПЦР (енглески асиметрични ПЦР) - се обавља када је неопходно појачати углавном један од ланаца изворне ДНК. Користи се у неким методама секвенцирања и хибридизације.
  5. Квантитативна ПЦР (Куантитативе ПЦР, К-ПЦР (Енг).), Или у реалном времену ПЦР - користи се за директно посматрање мерење количине специфичног ПЦР производа у свакој реакционој циклусу.
  6. Степ ПЦР (Тоуцхдовн ПЦР (енглески)) - овај приступ смањује ефекат неспецифичног везивања прагова.
  7. ПЦР специфични за ПЦР (ПЦР) - ПЦР за повезане секвенце унутар једне или између различитих врста, користећи конзервативне прајмере у овим секвенцама.

Ако је нуклеотидна секвенца матрице делимично позната или уопште непозната, могу се користити дегенерисани прајмери ​​чија секвенца садржи дегенериране позиције у којима се могу налазити било које базе. На пример, секвенца прајмера може бити:... АТХ..., где је Х А, Т или Ц.

Који биолошки материјали се истражују?

Разноликост биолошких течности и течности може послужити као материјал за ПЦР студију у којој је могуће идентификовати страну ДНК бактерију или ДНК или РНК вируса:

  1. Урин. Може се користити за инфекцију уринарног тракта код мушкараца и уринарних органа код жена (за мушкарце, употреба као материјал за урин замењује епително стругање).
  2. Очекивања. Користи се за дијагнозу туберкулозе и чешће за дијагнозу респираторних облика хламидије и микоплазмозе. Спутум у количини од 15-20 мл се сакупља у стерилној (једнократној) бочици.
  3. Биолошки течности. Сок од простате, плеуралног, цереброспиналном, амнионске, заједничке течности, бронхоалвеоларним, пљувачке су предузете у складу са индикацијама.
  4. Епителне струготини од слузокожа. Обично користе за дијагнозу сексуално преносивих болести (СТД) попут гонореје, хламидије, мицопласмосис, уреапласмосис, трихомонијазе, вагинозе, херпес и друге инфекције утичу слузокожу.
  5. Биопсија. Најчешће су користиле биопсије стомака и дуоденума како би се идентификовала инфекција Хелицобацтер пилори.
  6. Крв, плазма, серум. Користи се за ПЦР анализу хепатитиса Б, Ц, Д, Г, херпеса, ЦМВ, ХИВ, људских гена.

Како се припремити за анализу?

Поузданост резултата ПЦР-а зависи директно од тачности испоруке материјала за испитивање. Материјал не сме бити контаминиран, иначе резултат истраге неће бити објективан. Најважније препоруке пре поласка ПЦР анализе укључују следеће захтеве:

  1. Урин се испоручује ујутру у стерилном посуду.
  2. Тест крви за инфекцију треба узети у празан желудац ујутро.
  3. Није потребно приказати сексуалну активност дан пре анализе.

Резултат анализе ће бити спреман за 1,5-2 дана након поступка који се разматра. Постоје ситуације у којима се резултат може припремити истог дана.

Објашњење анализе КНР

Процес тумачења представљеног истраживања одликује његова једноставност. Резултати ПЦР анализе се могу добити након 1.5-2 дана након испоруке материјала. У неким случајевима, резултат је спреман првог дана, и то је оно што они могу да значе:

  • Негативан резултат показује да је тражени инфективни агент одсутан у дијагнозираном материјалу.
  • ПЦР позитивно значи да постоји ДНА или РНА патогена у људском телу.

У неким случајевима врши се квантитативно одређивање микроорганизама. Ово се посебно односи на болести изазване опортунистичким микроорганизмима. Пошто ове бактерије показују своје негативне ефекте само када је количина прекомерна.

Такође, квантитативна ПЦР анализа је важна за избор терапеутске тактике и ради контроле третмана вирусних инфекција као што су вируси ХИВ и хепатитиса.

Колико је тачна ПЦР дијагноза инфекција?

Метода ПЦР карактерише висока тачност, специфичност и осетљивост. То значи да је ова анализа способна:

  • тачно одредити присуство или одсуство инфекције;
  • Прецизно наведите која је тачно ова инфекција (специфичност);
  • Да би се открила инфекција чак и при веома ниском садржају ДНК микроба у биолошком материјалу,
  • који је био предмет истраге (осјетљивост).

ПЦР анализа: цена и време

Цена специфичне анализе ће зависити од врсте инфекције на коју ћете бити тестирани. Приближне цене и услови:

  1. СТИ: 300-500 рубаља, услови - 1 дан;
  2. Епстеин-Барр вирус, хуман папилломавирус, херпес, цитомегаловирус: 300-500 руб, термини - 1 дан;
  3. Хепатитис А, Б, Ц, Д, Г: квалитативна анализа 650 рубаља, квантитативна анализа 2000 рубаља. Услови - до 5 дана;
  4. Антитела на вирус хепатитиса Ц, укупно (Анти-ХЦВ) - 420 рубаља;
  5. Антитела на вирус хепатитиса Ц, ИгМ (Анти-ХЦВ ИгМ) - 420 рубаља;
  6. Хелицобацтер пилори (Хелицобацтер пилори): 300-400 руб, термини - 1 дан;
  7. ХИВ (антитела и антигени) - 380 рубаља;
  8. ХИВ РНА, квалитативно - 3 500 рубаља;
  9. ХИВ РНА, квантитативно - 11 000 рубаља.

Да бисте уштедели новац, можете одабрати фиксни пакет тестова. Ову услугу пружа већина клиника гдје је могуће проћи анализу методом ПРЦ (ин витро, онцлиниц итд.).

Која је дијагноза од стране ПЦР-а? Које болести одређују?

Модерне високотехнолошке методе лабораторијских истраживања могу идентификовати болести у почетној фази. Инфективне болести се развијају и еволуирају, постају све теже идентификовати. Дијагноза путем ПЦР-а (полимеразна ланчана реакција) је једна од најновијих и најтачнијих. За његов развој научник Цари Миуллис добио је Нобелову награду.

Полимеразна ланчана реакција - метода молекуларне-генетског дијагностици, која омогућава да пронађу људи имају различите врсте инфективних и наследних патологија, акутних и хроничних, а много пре патологија почне да се манифестује. Већина лекара се суочавају са овом анализом на дневној основи и не могу да замислим, без да је могуће направити тачну дијагнозу и стадијум болести.

Дијагноза путем ПЦР-а (полимеразна ланчана реакција) је једна од најновијих и најтачнијих

Суштина ПЦР дијагностике

У анализи ПЦР-а користе се принципи молекуларне биологије. Када се спроведе, користе се посебни ензими који више пута копирају РНА и ДНК фрагменте, као и микроорганизме који изазивају болести и који су у људским биолошким материјалима. Копирање се одвија у неколико фаза, стога се формира ланчана реакција. После тога, стручњаци лабораторије врше усклађивање добијених података са заједничком базом и идентификују узрочнике болести, као и њихову концентрацију. Дијагноза се обавља у посебном уређају који производи хлађење и грејање цијеви помоћу биоматеријала и назива се појачавачем. Опрез температуре режима утиче на веродостојност резултата анализе.

Фрагменти ДНК микроорганизама могу бити садржани у следећим биолошким материјалима:

  • биолошке течности;
  • крв и његови деривати;
  • стругање епителних ћелија или мрља;
  • урина;
  • спутум;
  • слуз и други биолошки излити;
  • биопати слузнице мембране гастроинтестиналног тракта.

Где се користи дијагноза ПЦР?

Могућности дијагностиковања заразних болести уз употребу полимеразне ланчане реакције су одличне, могу се користити за идентификацију најразноврснијих вируса који узрокују такве инфекције као што су:

  • ХИВ-ПЦР дијагностика ХИВ-а је веома ефикасна за откривање вируса који узрокује ову болест, блокира заштитне функције и отвара пут људском телу за све врсте патологија;
  • херпес - дијагноза херпес симплекса ПЦР може открити вирус код људи само током релапса, овај метод омогућава вам да одредите који је то тип;
  • генитоуринарне инфекције - ПЦР дијагноза урогениталног инфекција (Цхламидиа, уреапласмосис, бактеријске вагинозе, мицопласмосис, трихомонијазе, кандидијазе, итд) данас активно користе као идентификацију патогени сексуално преносивих инфекција конвенционалним тестовима је тешко, а дијагноза инфекција помоћу ПЦР дозвољава минимум сампле откривају присуство патогених микроорганизама и правовремену почетну терапију;
  • Хепатитис - Хепатитис Дијагноза помоћу ПЦР је један од најважнијих корака за идентификовање узрока својим изгледом и сврху адекватних режима лечења, без употребе модерних техникама молекуларне биологије да обезбеде адекватну дијагнозу ове болести није могуће;
Могућности дијагностиковања заразних болести уз употребу полимеразне ланчане реакције су одличне, могу се користити за идентификацију различитих вируса које узрокују различите инфекције
  • Листериоза - ПЦР дијагностика може открити чак и поједине патогене ове болести у најкраћем могућем року;
  • цитомегаловирус - ПЦР дијагноза ове болести сматра се прогресивном, али не омогућава утврђивање да ли је инфекција примарна или поновљена, другим ријечима, не разликује активни вирус од спавања;
  • ТБ - ПЦР дијагнозу туберкулозе помаже да детектује присуство активног облика болести неколико пута брже од других студија, такође помоћу ове анализе могуће је спровести епидемиолошки надзор за МБТ усред очигледне стабилизације пацијента. За дијагнозу туберкулозе код деце чине Мантоук тест ако је позитиван, ПЦР методом са високом прецизношћу да потврди дијагнозу и одредити не само од туберкулозе, али и порази Овај вирус кожу, бубреге, црева и других органа;
  • хумани папиломавирус - ПЦР дијагноза ХПВ се користи да одреди његов тип и помаже у одређивању квантитативних и квалитативних карактеристика вируса;
  • Снажни енцефалитис - резултати ПКР у одређивању хроничног облика болести су најпоузданија;
  • инфекција хелмината - дијагностика паразита помаже да се идентификују инвазије протозоа, као и интрацелуларни паразити, али не дозвољава утврђивање тежине инфекције и броја штеточина у организму;
  • Хеликобактер пилори инфекција - користећи ПЦР метод, могуће је одредити високо патогене и нископатогене матрице Хелицобацтер Пилори, ово је важно за прогнозу болести и ефикасну терапију.

Ово није потпуна листа болести која се открива анализом ПЦР-а. Већина ових патологија у раној фази је готово невидљива, али ефекти њихових ефеката на тело су изузетно негативни и често опасни за људско здравље и живот.

Трудницама се даје анализа ПЦРЦ-а да идентификује полно преносиве инфекције које значајно повећавају ризик од рака грлића материце, што негативно утиче на ток трудноће и здравље детета. Због тога је дијагноза СТД изузетно важна како би се спречила инфекција фетуса са патогеним микроорганизмима.

На основу свега наведеног, можемо закључити да лабораторијска дијагностика помоћу ПЦР методе помаже лекару да успостави тачну дијагнозу и прописује ефикасну терапију у сваком појединачном случају.

Интересантно је! Поред медицине ПЦР методом се примењује у другим областима, као што су форензика, када је потребно да се утврде ко је власник место злочина пронашла биоматеријала, а понекад и ПЦР је коришћен за одређивање очинство, да спроводи експерименте са мутаната ДНК и других експеримената.

За и против методе

Предности ПЦР дијагнозе су:

  • висока осетљивост теста омогућава утврђивање чак и појединачних агенса патогена, што омогућава идентификацију патологије у раној фази, у хроничној и латентној форми;
  • универзалност метода омогућава коришћење скоро свих биоматеријала за истраживање од пљувачке до ћелија коже;
  • велика покривеност - у проучавању једног примерка могуће је утврдити присуство неколико различитих патогена;
  • тачност - висок ниво овог метода омогућава вам да не дајете лажне резултате;
  • брзина - резултат је у просеку спреман за пет сати, тј. пацијент наредног дана након испоруке биоматеријала већ може закључити;
  • релативно ниска цена - овај метод дијагнозе по трошку се не разликује од других лабораторијских тестова крви;
  • Користећи ову методу, може се извршити претклиничка и ретроспективна дијагностика. Прво идентификују патогене и пре почетка болести, а други је одржан након што је претрпио патологије која омогућава да се развије болест и излечити га на време, и да се идентификују и латентни облик болести јавља се без очигледних симптома.

Али нема савршених дијагностичких метода, стога, ПЦР има своје недостатке:

  • високи захтјеви за усклађеност са технолошким процесом;
  • Високи захтеви за професионализам лабораторијских техничара.

Савет! Провођење такве анализе је најбоље само у најбољим и професионалним лабораторијама, где се имплементирају строги системи контроле квалитета.

Свестраност методе дијагностике ПРЦ-а омогућава коришћење скоро свих биоматеријала за истраживање од пљувачке до ћелија коже

Препоруке за припрему за анализу

За поузданост резултата потребно је придржавати се правила прелиминарне припреме за анализу:

  • када дасте пљувачу, не можете јести и пити лекове четири сата пре теста, пре него што поступите, требало би да испрате уста куханом водом, а затим држите малу кожну масажу како бисте извадили тајну из жлезде;
  • Урин се обично сакупља код куће. Прије тога неопходно је опрати гениталије и сакупљати у посебном контејнеру 50 мл првог јутарног урина, неадекватно је сакупљати материјал током менструације;
  • пре испоруке сперме, човеку треба три дана да не улазе у сексуалне односе, да не посећују сауну, не пливају у врелом купатилу, не узимају алкохолна пића и зачињену храну. Одмах пре испитивања забрањено је уринирати три сата;
  • за испоруку урогениталног размаза, препоручује се одсуство сексуалног односа три дана. Две недеље пре испитивања, антибактеријски лекови нису дозвољени. Недељу дана, требали бисте престати користити интимне гелове, масти, вагиналне супозиторије, немојте туширати. Три сата прије узимања биоматеријала потребно је уздржати од одласка у тоалет.
  • крв предаје ујутру до празног желуца.

Материјал за дијагностику треба сакупљати под условима који искључују њену контаминацију, јер то може значајно утицати на истинитост резултата ПЦР-а.

Објашњење анализе

Анализа може показати позитиван или негативан резултат. Негативно значи да у телу нема наводних инфекција, а особа је здрава. Позитивно говори да је пацијент болестан и да му треба лечење. Доктора треба да дешифрује и изрази све показатеље. Немојте бити узнемирени и уплашени због лоших резултата, на основу којих је прописана терапија, главна ствар није одлагање процеса и неупотреба само-лијечења.

ПЦР анализа: шта је то?

ПЦР дијагностика (полимеразна ланчана реакција) једна је од најсавременијих метода истраживања молекуларне биологије и има неке предности у односу на друге методе.

Хајде да погледамо, ПЦР анализа - шта је то?

Од свих лабораторијских студија, ПЦР метода се сматра једним од најтачнијих за дијагностику различитих болести узрокованих вирусима или бактеријским агенсима. Поред тога, ПЦР дијагностика постаје доступнија свакодневно, а повећани ниво специфичности гарантира тачне и коректне резултате, искључујући лажне одговоре.

Полимеразна ланчана реакција је у могућности да у једноставном смислу помножи потребни регион патогене ДНК у тестираном материјалу.

Поред повећања ДНК патогена, ова дијагностичка метода се користи за одређивање очинства, клонирања гена, идентификације наследних болести и других.

Полимеразна ланчана реакција је у могућности да појача, у једноставним изразима, помножи потребни регион патогене ДНК у материјалу за тестирање

Које болести могу бити дијагностиковане са ПЦР?

Дакле, шта је ово: ПЦР анализа, и зашто се ова метода користи? Специјалиста може прописати ПЦР за откривање различитих инфекција у организму бактеријског или виралног порекла. Такође уз помоћ ПЦР-а могуће је открити инфекције које имају хроничан курс или латентни. ПЦР анализа је ефикасна чак и ако организам садржи поједине ћелије патогена.

У случају ПЦР за идентификацију објекта одредиште гениталне инфекције могу бити Цхламидиа, Трицхомонас, Цандида, Мицопласма, Уреапласма, папилома вируса и патогена гонореје, Гарднерелла.

Да би се утврдио узрочник за лезије гениталног тракта, материјал за ПЦР анализу се узима уз помоћ мрља из вагине, уретре или цервикалног канала.

Да би се утврдио узрочник у лезијама гениталног тракта, материјал за ПЦР анализу узима се узорком из вагине, уретре или цервикалног канала

Пре планирања трудноће или кад су у питању потенцијални родитељи, потребно је проћи тестове за дијагнозу ПЦР-а за присуство заразних болести. На крају крајева, планирање за трудноћу је веома важан животни век за будућу мајку и бебу, тако да морате одговорно преузети одговорност за концепцију. Ако су, ипак, у телу жене и мушкарца идентификовани патогени инфекције, боље је одгодити планирање трудноће у време лечења.

Поред инфекција гениталног тракта, други патогени могу се открити са ПЦР-ом, као што су:

  • Присуство вируса Б и Ц у телу: ПЦР анализа ће помоћи у одређивању врсте вируса који је узрочник хепатитиса чак и пре клиничких манифестација болести; ПЦР метода ће помоћи стручњаку да изабере тачан третман болести и надгледа њену ефикасност;
  • Присуство патогена туберкулозе: овај метод испитивања може идентификовати такве облике туберкулозе који не могу одредити друге лабораторијске тестове; препоручује ПЦР ако особа има одговарајућу симптоматологију, на пример, телесна температура расте, запаљенски процеси почињу у дисајним путевима, позитивна реакција се примећује у туберкулинском тесту;
  • Вирус хумане имунодефицијенције;
  • Епстеин-Барр вирус и цитомегаловирус;
  • Хеликобактерија.

Користећи ПЦР, вируси Б и Ц могу се открити у телу

Како се проводи ПЦР анализа?

За презентацију онога што је - ПЦР анализа, морате знати како се ова студија спроводи.

Након узимања материјала за студију, пресељен је у посебан апарат, где се постављају посебни ензими, што доприноси стварању генетског материјала. После тога, ДНК и РНА вируса почињу да се копирају, све док се не повећава до количине на којој ће бити могуће идентификовати узрочник агенса болести.

Материјал за истраживање је углавном крв, али такође користи и урину, фарингеални брис и друге материјале.

Жене најчешће репродукују ограду материјала из цервикалног канала и уретре. У овом случају, за прави резултат веома је важно припремити процедуру. Обука обухвата следеће:

  • 3 дана пре анализе ПЦР-а, жена треба да се уздржи од сексуалног односа;
  • Прије процедуре, немојте мокрити;
  • Након завршетка менструације треба да траје 4-5 дана пре испитивања.

Важно је напоменути да вам није потребна специјална обука да бисте узимали крв.

Материјал за истраживање је углавном крв, али такође користи и урину, фарингеални брис и друге материјале

Одговори од ПЦР-а

Декодирање одговора обично је спремно следећег дана. Постоје само два резултата: позитивна (ако постоји инфекција у телу) и негативна (ако ДНК патогена није детектован).

Када одговоримо на питање шта је то - ПЦР анализа, може се недвосмислено рећи да је важност ове лабораторијске методе истраживања тешко прецијенити. Таква дијагностика може контролисати спровођење прописане терапије за вирусе и инфекције, посебно у случајевима хепатитиса и ХИВ-а.

Шта је тест крви за ПЦР, и зашто је то потребно?

Дијагноза заразних болести - бактерија и вируса - има за циљ рано откривање патогена, што нам омогућава да преписујемо рану и најефикаснију терапију. Најсавременији начин дијагностиковања инфекција је ПЦР или полимеразна ланчана реакција. Па шта је ова метода, и за шта је то?

Суштина реакције полимеразе

Сваки микроорганизам и вирус садрже у својој структури молекула ДНК или РНК. Свако од ових једињења је јединствено, па ако изаберете нуклеинске киселине у тесту крви код деце или одраслих, можете га дијагнозирати са апсолутном тачношћу.

Нажалост, концентрација ДНК у узорцима крви или другим биолошким материјалима је довољно ниска и не може се одредити коришћењем конвенционалних дијагностичких метода. Да би се суочили са овим проблемом, пронадјена је реакција полимеразне ланце.

Суштина ПЦР-а је специјална обрада узорка крви, чиме се повећава концентрација молекула ДНК, чије одређивање у будућности омогућава утврђивање врсте патогена и дијагнозу.

Како донирати крв у ПЦР

Приликом припреме за анализу треба придржавати се општих препорука: не пити и не јести одмах пре испитивања крви. Иако је могуће строго придржавати ових захтјева тако да се крв не може испоручити у ПЦР, с обзиром на то да тачност теста не зависи од тога да ли је направљен тестирани или празан стомак.

Које болести могу да се открију помоћу ПЦР-а

Уз помоћ ПЦР-а, можете идентификовати готово било какве виралне и бактеријске болести. За анализу користе се не само крв, већ и други биолошки материјали: сперма, пљувачка, мрља из уретре и из грлића материце. Тест крви ће бити информативан ако узрочник одређене болести улази у крв особе. Према томе, ПЦР крви је прописан за следеће болести:

  • вирусни хепатитис А, Б, Ц, Д и ТТ;
  • цитомегаловирус;
  • херпетична инфекција (херпес вируси 1, 2 и 4 врсте);
  • ХИВ инфекција
  • ентеровирусна инфекција;
  • шиндре;
  • рубела;
  • токсоплазмоза;
  • инфективна мононуклеоза;
  • листериоза.

Ако узмемо у обзир могућност провере ПЦР других биоматеријала, онда на листи болести откривених ПЦР-ом треба додати:

Од посебног значаја тренутно је ПЦР анализа крви труднице на такозваним ТОРЦХ инфекцијама: цитомегаловирус, токсоплазмоза, рубеола и херпесвирус инфекција. Ово је због чињенице да ове болести могу довести до аномалија развоја фетуса.

Предности ПЦР

  1. 100% тачност дијагнозе - ако у крви има чак неколико фрагмента ДНК, биће откривени и прецизна дијагноза. Ово је главна разлика ове методе од других метода дијагнозе - ЕЛИСА, генерални тест крви и други.
  2. Специфичност. Код спровођења ПЦР-а не постоји лажно позитиван или лажно негативан резултат. За разлику од ензимског имунолошког теста (ЕЛИСА).
  3. Могућност анализе неколико патогена из једног узорка биоматеријала одједном, што чини метод погодном за пацијента, не мора се анализирати неколико пута.
  4. Брзо. Није неопходно изоловати и гајити патог на хранљивим медијима, као што се то ради у бактериолошким студијама. Резултат може бити спреман већ на дан анализе.
  5. Уз помоћ ПЦР-а, узрочници агенса латентних болести се идентификују када је патоген присутан у организму, али још није изазвао болест, или када је пацијент носилац инфекције (хепатитис или ХИВ).
  6. Ниски трошкови. Цена ПЦР анализе за један патоген је 250-500 рубаља. Мало скупље је полквантитативна анализа за вирусе - око 1000 рубаља.

Недостаци анализе

ПЦР је високотехнолошки метод истраживања и захтева високе потребе за опремањем лабораторије. Простор у којој се врши анализа мора нужно бити опремљен биолошким филтером, јер у ваздуху увек постоје честице коже, слина која садржи молекуле ДНК у свом саставу. Непоштовање технике рада са биоматеријалима може довести до нетачних резултата.

Тест крви - декодирање код одраслих (ПЦР)

Тумачење резултата ове студије није тешко, јер не постоји табела стандарда за анализу крви за ПЦР. У образцу резултата постоје само две фразе:

  • негативни резултат - узрочник на коме је извршена анализа није откривена;
  • позитиван резултат - у телу постоји агент ове болести.

Требало би знати да ПЦР може бити позитиван чак иу одсуству клиничких симптома болести! Тумачење теста крви за ПЦР код деце се не разликује од оног код одраслих.

Ко треба да узме ПЦР тест

Свака особа може донирати крв за истраживање. Непосредна индикација за студију је сумња на сексуално преносиве инфекције (хламидија, гарднерелез, ХИВ инфекција). У случају ненамјерног незаштићеног сексуалног односа, само ПЦР ће помоћи у дијагнозирању у раној фази ако особа има уговорене било какве болести. Обавезну крв за комплекс ТОРЦХ даје трудница. И жене, само планирају трудноћу.

Иако је ПЦР најефикаснији начин дијагнозе, није вредно тога да се фокусира на то. Испитивање пацијента за било коју болест треба да има интегрисани приступ. Ако реакција ланца полимеразе омогућава идентификацију узрочног средства, серолошки тест омогућава процену ефикасности лечења, реакцију организма на патогене и лекове. Сви лекари треба да преписују све прегледе.

Да бисте видели како се проводи тест ПЦР анализе, моћи ћете да видите овај видео преглед:

Гудков Роман, реаниматор

17.400 укупно прегледа, 1 погледа данас

ПЦР дијагностика: на основу чега је биоматеријал и препарат, како они раде, за које болести је погодна?

ПЦР (полимеразна ланчана реакција) - постизање молекуларне биологије, једна од главних метода клиничке лабораторијске дијагностике крајем 20. и почетка 21. вијека, што је од велике користи у различитим областима медицинске науке.

Многи људи га збуњују са ЕЛИСА (ензим имуноассаи), који је уопште разумљив. На неки начин су донекле слични, пошто обављају један задатак - потрага за узрочним патолошким условима проузрокованим пенетрацијом заразних средстава у људско тијело. Међутим, постоје разлике између њих. ЕЛИСА, на пример, трага за останак микроорганизама, односно антитела (АТ) и ПЦР проналази "свети од холиес" патогена - ДНК или РНА (нуклеинске киселине), дајући живот странцу микроскопским људским бићима људског тела.

Нуклеинске киселине "непријатеља", које се налазе у свим биолошким течностима и телесним ткивима, доступне су методама ПЦР-а, Ова анализа не обавезује вас да користите само венску крв као тест, можете узимати пљувачку, испуштати из гениталног тракта, спутума или другог окружења, са информацијама о болести. Избор материјала за истраживање остаје код доктора који прописује једну или ону патологију и зна који је медиј у оваквим случајевима информативнији.

Шта је суштина полимеразне ланчане реакције?

ПЦР-студија је достигнуће и велико постигнуће молекуларне биологије. То је - метод који, проналажење мицропортионс ДНК или РНК страног генетичког материјала (геном), је у стању да препознају индивидуалне карактеристике које су јединствени за један микроорганизам ум не да га помешати са било којим другим. Како ПЦР методом, и како успева да реконструише понашање инфективних ћелија у живом организму?

ПЦР процес

Дакле, пронађен је фрагмент нуклеинске киселине, али то је један, а за реакцију очигледно није довољно, тако да је кодиран (копиран). Међутим, за даље поступке, потребан је велики број таквих микрорегиона, што може осигурати његово множење тако што ће довршити нове сегменте ДНК (репликације) идентичне фрагменту који се пронађе. Репродукција је природна и интегрална својства нуклеинске киселине са којом ће се реплицирати ензим полимераза чак и изван живог организма (у епрувети са сломом), формирајући много клонова, односно, отићи ће ланчана реакција. Клони ће бити све више и више нових фрагмената, али само они у којима је истраживач заинтересован. Зато важно је узети "чисту", без анализе страних материја, а тест да се одвија веома пажљиво.

С обзиром на наведене могућности полимеразне ланчане реакције, можете погађати зашто тако лако издваја уреаплазму из микоплазме или сваку од њих из кламидије.

Тако, чак и ако су милиони људских телесних ћелија губи се не живи вирус, већ само мало његове ДНК, ПЦР ако је ништа да спречи, можда, да се избори са задатком и извештај о присутности "аутсајдера" позитиван резултат. Ово је суштина ПЦР-а и његова главна предност.

Предности и мане

Лабораторија која врши ПЦР дијагностику има највише захтеве у погледу опреме, тестних система и квалификације медицинског особља. Ово је високотехнолошка лабораторија која има арсенал веома осјетљивих и високо специфичних реагенса, тако да нема посебних недостатака. Осим ако то не даје позитиван резултат у одсуству клиничких манифестација и тиме ставља клинику пред дилему: да ли је вредно почети са лечењем или не?

Доктор који посматра пацијента, почиње да сумња у поузданост резултата теста, јер он не види никакве знаке болести. Али ипак, с обзиром на високу осјетљивост ПЦР система, треба запамтити да открива патоген чак иу претклиничној фази, а позитиван резултат у овом случају је више предност него недостатак. Полазећи од овога, лекар који се присјећа мора одлучити о сврси терапије, узимајући у обзир друге аргументе "за" и "против".

Предности дијагностике користећи ланчану реакцију полимеразе су очигледне:

  • Висока специфичност, достижући 100%, због присуства у одабраном узорку честица нуклеинске киселине инхерентне у одређеном организму, али ванземаљце за људе;
  • Високе перформансе, јер је ПЦР техника аутоматизације високе технологије која дозвољава тестирање на дан узимања материјала и тиме се пацијент ослобађа непотребних забринутости;
  • ПЦР, који ради на једном узорку, способан је да спроведе неколико студија ида открије неколико патогена, ако има такав задатак. На пример, у дијагнози кламидне инфекције, где се ПЦР односи на главне методе, заједно са кламидијом, могуће је открити неиссериа (гонококус), узрочник гонореје. Штавише, поузданост резултата није негативно одражена;
  • ПЦР тестирање васје опасан микроорганизме у периоду инкубације, када још нису успели да изазову значајну штету организму, односно рану дијагнозу упозоравају на будући развој патолошког процеса, што омогућава да се припрема за то и да се у потпуности припреми.

Поред тога, да би се избегли неспоразуми, што понекад доводи у дијагностици ПЦР се штити од чињенице да се њени резултати бити фиксне (фотографија, компјутер) како би их користили да би стручњака, уколико то буде потребно.

Норма у одговору ПЦР-а је негативна, указујући на недостатак фрагмената страних нуклеинских киселина, позитиван одговор ће указати на присуство инфекције у телу, нумеричке вредности значе стање вируса и његову концентрацију у време испитивања. Међутим, комплетан транскрипт анализе врши лекар који је прошао посебну студију на тему "ПЦР". Покушај да интерпретирате резултате сами нема смисла, јер је могуће да ће се највероватније догодити, погрешно схватити и почети забрињавајући унапред.

Шта се "плаши" ПЦР-а, шта зна и како се припремити за то?

Као иу другим студијама, понекад су резултати теста лажно-позитивни или лажно-негативни, где ПЦР није изузетак. Ово се може десити у следећим случајевима:

  1. Поремећај процеса у једној од фаза реакције;
  2. Непоштовање правила за сакупљање, складиштење или транспорт материјала;
  3. Присуство страних нечистоћа у материјалу.

Ово указује на то да се ПЦР - дијагностиковање инфекција треба пажљиво и пажљиво приступити, у супротном узорци материјала могу променити структурну структуру или чак срушити.

Фазе ПЦР дијагностике. Лажни резултати могу дати кршење у било којој фази студије

ПЦР дијагностика инфекција спада у категорију "златних стандарда" међу другим лабораторијским методама, тако да се може користити за претраживање патогена многих болести, које на први поглед немају ништа заједничко једни са другима:

  • Туберкулоза различитих локализација, пнеумонија (укључујући атипичне, узроковане кламидијом);
  • Дјечије инфекције (ошамци рубела, паротитис, ошпори);
  • Дифтерија;
  • Салмонелоза;
  • Зоонотска заразна болест - листериоза (болест карактерише низ симптома уз укључивање лимфних чворова, централног нервног система, унутрашњих органа);
  • Болести проузроковане пенетрацијом вируса Епстеин-Барр (инфективна мононуклеоза, итд.);
  • Онколошка патологија, изазвана папилома вирусом (ХПВ и њени типови);
  • Боррелиоза (лајмска болест, енцефалитис који се преноси са ћелијама);
  • Хелицобацтер пилори инфекција, узрокована микробом Хелицобацтер пилори који живи у људском стомаку. Доказано је да Хелицобацтер узрокује развој канцера желуца или дванаестопалија;
  • Кандидија и готово сви СПД.

ПЦР-дијагноза инфекција, полно преносиве болести, је од посебног значаја, јер су болести узроковане тиме, често дуго времена проводи без икаквих клиничких манифестација, али током трудноће постају активни, и на тај начин угрожавају здравље, па чак и живот детета. Слично се понашајте и ТОРЦХ-инфекције. Неки од њих ("бакље") су истовремено повезани са СПИ, тако да други захтевају детаљније разматрање. Читач ће бити у могућности да се упозна са најпопуларнијим методама у наредним одељцима чланка.

Како правилно припремити да добијете поуздан резултат?

Одмах ћемо приметити, да је припрема за ПТСР довољно једноставна, било који посебан напор од пацијента који не захтева. Само је потребно извршити три једноставна задатка:

  1. Немојте имати сексуални однос 24 сата пре узимања теста;
  2. За сакупљање и анализу крви из вена, морате доћи до празног стомака и, узгред, не можете ни пити;
  3. Да се ​​предају урин након ноћи (ујутро - у стерилном јарлу, купили дан раније у дрогерији).

ПЦР може радити у било ком биолошком окружењу

Метода ПЦР није "крвожедна", тако да прихвата било који биолошки медијум који садржи потенцијални инфективни агент. избор - шта треба да предузмете за истраживање, остаје за доктора.

Тако, у потрази за агентом који није тест крви (иако се такође уклапа и у већини случајева узима се паралелно са другим материјалом), можете користити:

  • Млаз (излучивање урогениталног тракта);
  • Соскоб слузнице усне шупљине, коњунктива, назофаринкса, гениталног тракта (код жена узиманих из грлића материце и вагине, код мушкараца - из уретре);
  • Салива;
  • Сперм;
  • Сок од простате;
  • Плацента ткива и амниотска течност (амниотска течност);
  • Седимент у урину (након центрифугирања), на примјер, идентификује одређене СПИ и микобактерије туберкулозу;
  • Спутум и плеурална течност за исту сврху;
  • Екудатес;
  • Цереброспинална течност када се сумња на заразну болест ЦНС-а;
  • Материјал биопсије (биопсија), узет из јетре, 12 дуоденум, желудац итд.

На горе и желите да додате тај материјал за тестирање у свим случајевима, чак иу ће огреботина и емисија бити довољно, јер је тестирање од стране ПЦР великим количинама не захтева анализу недостаје и неколико микролитара, које се обично предузимају на тип микроцеви "Еппендорф" и послат на истраживање.

Болести и употреба ПЦР

ХИВ и полимеразна ланчана реакција

Обично, када се анонимно испитивање врши у случају позитивних резултата имуноблота, дијагноза ХИВ инфекције се поново понавља. Ако се дијагноза потврди, пацијенту се додјељују додатне студије:

  1. Одређивање помоћу имунолошких реакција апсолутних вредности броја ЦД лимфоцита4 (Имуни ћелије - Т-помагачи или помоћници) који су инфицирани на првом месту, онда губе своја основна својства и не може да направи разлику између "своје" и страних ". Циркулишући у плазми крвне РНК вируса узимају се за нормалне ћелије тела и не реагују на њих;
  2. Детекција вируса РНК методом ПЦР и израчунавање концентрације честица вируса како би се утврдила стадијум, тежина патолошког процеса и прогноза узимајући у обзир ове податке. Наравно, реч "норма" у овом плану не постоји, јер је реакција увек позитивна, а тумачење дигиталних вредности је у надлежности доктора.

ПЦР и хепатитис

Метода ПЦР може идентификовати патогене хепатитиса, најчешће се тест користи за дијагнозу Ц хепатитиса, што је слабо дефинисано другим методама.

Вир хепатитиса Ц (који садржи РНК) подсећа на ХИВ у свом понашању у људском телу. Уедгинг у геном ћелије јетре (хепатоцити), она остаје ту, чека на крилима, који се могу појавити чак и после 2 године, најмање 20 година, па су лекари су га звали "нежан убица". Хепатитис Ц доводи до стварања малигног процеса у хепатичном паренхима, који се манифестује у касним фазама. Сви ови догађаји имуни систем не примећује, узимајући вирус за хепатоцит. Истина, произведена су антитела на вирус у неким количинама, али не пружају пристојан имунолошки одговор. За дијагнозу ЕЛИСА хепатитис Ц није много информативан, јер указује на то да је вирус оставио трагове, али да ли је отишао - није познато. Када ХЦВ познати случајеви само-исцељења, док се антитела против вируса настављају да циркулишу и остају живота (имунолошке меморије). ПЦР је добро испред формирања антитела и може детектовати вирусне честице после 1-1,5 недеље, док АТ могу појавити у опсегу од 2 до шест месеци

ПЦР дијагностика у случају сумње на бинге вируса Хепатитис Ц у људском тијелу је најоптималнији метод истраживања, јер само је у стању препознати присуство "љубазног непријатеља" у пацијенту са биопсијом крви или јетре.

Међутим, понекад постоје случајеви када су АТ-ови позитивни, а резултат ПЦР-а је негативан. Ово се понекад дешава са врло малом количином вируса или када је "у стању мировања" у јетри без напуштања крвотока. Да би се пронашла истина, пацијент се поново анализира, а понекад и није сам.

Папилломовирусна инфекција

ХПВ-(Хумани папилома вирус), осим ако не постоји Самоисцељуљући, такође може да не се докаже, дуго истрајати у домаћину, који не зна за то, јер није било могуће да се уради ПЦР, а симптоми су били одсутни. Међутим, присуство инфекције папилломовируснои, ипак латентна, није равнодушан према здравље где посебне опасности су одређени типови вируса који узрокују рак (типови 16, 18).

ХПВ-често трпи женску половину становништва, као вирус воли женски репродуктивни систем, а посебно - грлић материце, где неке врсте вируса допринети развоју диспластичним процеса, а затим до рака грлића материце ако се не лечи дисплазија и ослободи вирус. Дакле, ланац реакција полимеразе за откривање вирусне ДНК, а затим указује "лош" или "добар" (онкогена или неонкогена) Тип населили у телу жене.

Остали СПИ и ТОРЦХ инфекције

Очигледно је да ланчана реакција полимеразе може пронаћи било коју страну структуру која се састоји од нуклеинских киселина, па је овај тест погодан за откривање свих СТД-ова и ТОРЦХ инфекција, али се не користи увек. Зашто, рецимо, проводите тако скупе студије да бисте открили Трицхомонас или гонореју, ако су доступнији и јефтини?

Инфекције ТОРЦХ-а и СПИ су тако међусобно повезани да је у неким случајевима тешко одредити коју групу треба приписати једном или другом узрочном агенсу. Они обично може бити тешко разумети, јер је прилично разнолика група микроорганизама који могу да се преносе сексуалним је увек или само под одређеним условима (имунодефицијенције), а могу бити од интереса само за време трудноће, због могућег негативног утицаја на ток и на фетус.

ПЦР је главни метод откривања скривених инфекција

У срцу развоја клиничких манифестација су различити патогени, који се налази само ПЦР, која је њен главни задатак понекад у сарадњи са ИФА, а понекад као једини потврдни тест, посебно ако је симптоматологија болести одсутна. Таква тешка ситуација може створити полимикробну инфекцију, која поред експлицитних патогена укључује и опортунистичке патогене.

Код мушкараца који пате од инфламаторних обољења гениталног подручја, на пример, често се детектују уретритис, кламидија, уреаплазма и микоплазма. Ове исте врсте такође угрожавају женско тело. Они који знају Перфиди Цхламидиа и суочен је, ће се сетити колико је тешко је то да се пронађу и препознају, тако да је анализа, у продукцији ПЦР на хламидију, а посебно поверење, након скривања у ћелији је веома малих димензија паразита понаша нежно и повреде увек скривено.

Уреаплазма се често лечи у комбинацији са микоплазмом. И није случајно. Ове врсте, попут кламидије, не односе се ни на вирусе ни на бактерије, живе у ћелијама и припадају СПИ-има, иако њихово присуство у здравом телу такође није неуобичајено. Дакле, да би се разликовао здрави носач од болесне особе, неопходне су посебне методе, где се ПЦР сматра најпоузданијим, јер се, с обзиром на специфичности структуре и понашања ових микроорганизама, друге студије показале као неефикасне.

Што се тиче херпесог вируса (тип 1, 2) и цитомегаловируса, који такође припада херпесвирусу (тип 5), ситуација овде такође је двосмислена. Инфекција светске популације је близу 100%, тако да у овом случају је веома важно да се идентификује вирус и његову дозу, која се посебно игра улогу у трудноћи, као одрасла особа, вирус је корене у његовом телу, често не изазивају никакве проблеме и знаке болести не.

Стога, не треба занемарити рецепт код доктора попут истраживања, јер у неким случајевима, реакција ланчаног је обавезан и неопходан метод лабораторијске дијагностике које се штите од озбиљних компликација, не само жене, већ и млади, нерођеног, човека.

У закључку, желим да укажем да је тако диван начин као што је ПЦР служио хуманости више од 30 година. Истовремено, задаци теста нису ограничени само на претраживање инфективних агенаса. Полимеразна ланчана реакција, рођена на основу молекуларне биологије, нераскидиво је повезана са генетиком успешно се користи у криминологији за идентификацију идентитета, у форензичкој медицини за успостављање очинства у ветеринарској медицини, ако животињска клиника има прилику да купи скупу опрему, као иу другим областима (индустрију, пољопривреду итд.).

Шта је ово?

Полимеразна ланчана реакција (ПЦР, ПЦР) изумио је 1983. године Цари Муиллис (амерички научник). После тога, добио је Нобелову награду за овај проналазак. Тренутно, ПЦР дијагностика је једна од најтачнијих и осетљивих метода дијагностиковања заразних болести.

Полимеразна ланчана реакција (ПЦР) - експериментална метода молекуларне биологије, начин значајно повећање концентрације одређених малих фрагмената нуклеинске киселине (ДНК) у биолошком материјалу (узорак).

У срцу методе ПЦР је вишеструко удвостручење специфичног региона ДНК ензима под вештачким условима (ин витро). Као резултат, количина ДНК је довољна, довољна за визуелну детекцију. У овом случају копира се само део који задовољава дате услове и само ако је присутан у узорку под студијом.

Осим просто повећање броја ДНК копија (овај процес се назива амплификација), ПЦР омогућава многе друге манипулације генетичког материјала (увођење мутација, сплице ДНК фрагмената), и широко се користи у биолошком и медицинској пракси, на пример, за дијагнозу (генетски, инфективни), успоставити очинство, клонирати гене, увести мутације, изоловати нове гене.

Специфичност и примена

ПЦР-вам да дијагнозу присуство бити дужа патогена, без ослањања на микробиолошких метода времена, што је посебно важно у гинекологији и урологије у дијагностици урогениталног инфекција, полно преносивим инфекцијама (СПИ).

Такођер, овај метод се изводи дијагноза вирусних инфекција као што су хепатитис, ХИВ, итд Осетљивост методе је значајно супериорнији ономе у иммунохомицхеских и микробиолошким методама, а принцип метода за дијагностиковање присуства инфекције са значајним антигенски варијације.

Специфичност ПЦР-а коришћењем ПЦР чак и за све вирусне, кламидне, микоплазме, уреаплазме и већину других бактеријских инфекција достиже 100%. Метода ПЦР омогућава детекцију чак и појединачних ћелија бактерија или вируса. ПЦР дијагностика открива присуство патогена заразних болести у оним случајевима када је то немогуће урадити другим методама (имунолошки, бактериолошки, микроскопски).

ПЦР метод је посебно ефикасан за дијагнозе тешко култивисаних, некултурне и скривене облике постојећих микроорганизама који се најчешће наилази у латентне и хроничних инфекција, јер овај метод избегава тешкоће у вези са узгојем ових микроорганизама ин витро.

Употреба ПЦР дијагностике је такође веома ефикасна против патогена са високом антигеном и променама интрацелуларних паразита. детекција ПЦР не само могућа патогени у клиничкој материјал добијен од пацијента, али иу материјалима изведеним из објектима околине (воде, земљишта и тако даље. Д.). У уролошки и гинеколошке праксе - за детекцију кламидија, уреапласмосис, гонореју, херпеса, гарднереллоза, Мицопласма инфекција, ХПВ - хумани папилома; у пулмологији - за диференцијалну дијагнозу вирусне и бактеријске пнеумоније, туберкулозе; у гастроентерологији - за идентификацију Хеликобактеријезе; у клиници заразних болести - као експресиван метод за дијагностицирање салмонеле, дифтерије, виралног хепатитиса Б, Ц и Г; у хематологији - за откривање инфекције цитомегаловирусом, онковируси.

Специфичност ПЦР базирана је на формирању комплементарних комплекса између матрице и прајмера - кратких синтетичких олигонуклеотида од 18 до 30 слова дужине. Сваки од прајмера је упоредив (комплементаран) са једним од праменова двоструке матрице, уоквирујући почетак и крај амплификованог региона.

Афтер једињења (хибридизације) са шаблона прајмера (жарења), други служи као прајмер за ДНК полимеразе током синтезе шаблона комплементарног ланца.

  • ДНК шаблон који садржи део ДНК који се појачава;
  • два прајмера комплементарна са крајевима жељеног фрагмента;
  • термостабилна ДНК полимераза;
  • деоксинуклеотид трифосфати (А, Г, Ц, Т);
  • иони Мг2 +, неопходни за рад полимеразе;
  • пуферно решење.

ПЦР је обављена у Тхермоцицлер - уређаји пружање периодичне хлађења и грејања цеви, типично са прецизношћу не мање од 0,1 ° Ц. Да би се избегло испаравање реакционе мешавине, уље на уље са високим кључањем, на пример, вазелинско уље, додаје се у цев. Додавање специфичних ензима може повећати принос ПЦР реакције.

Када су ланци раздвојени, температура се спушта тако да прајмери ​​могу да контактирају једнострану шаблону. Ова фаза се зове аннеалинг. Температура жарења зависи од прајмера и обично је изабрана на 4-5 ° Ц испод њихове тачке топљења. Време учествовања је 0,5 - 2 минута.

ДНК полимераза реплицира ланац шаблона, користећи прајмер као прајмер. Ово је позорница елонгација. Температура издужења зависи од полимеразе. Често коришћене полимеразе су најактивније на 72 ° Ц. Време елонгације зависи од типа ДНК полимеразе и дужине појачаног фрагмента. Уобичајено је да је време издужења један минут за сваку хиљаду базних парова. Након завршетка свих циклуса, додатна фаза финалног издужења се често изводи како би се завршили сви једноручни фрагменти. Ова фаза траје 10 - 15 минута.

Речник

ДНК - деокирибонуцлеиц ацид - биолошки полимер, један од два типа нуклеинске киселине, пружајући складиштење, пренос из генерације у генерацију и реализацији генетичког програма развоја и функционисања живих организама. Главна улога ДНК у ћелијама - дугорочно складиштење информација о структури РНК и протеина.

РНА - Рибонуклеинска киселина - биолошки полимер, у својој хемијској структури у ДНК. Молекул РНК је конструисан од истих мономерних јединица - нуклеотида као ДНК. У природи, РНА, по правилу, постоји у облику јединственог ланца. У неким вирусима, РНА је носилац генетских информација. У ћелији игра важну улогу у преносу информација од ДНК до протеина. РНА се синтетише на ДНК шаблону. Овај процес се зове транскрипција. ДНА има области у којима информације одговоран за синтезу три врсте РНК разликују по функцији: информација или мессенгер РНК (иРНК), рибосома (рРНК) и транспортних (тРНА). Све три врсте РНК на један или други начин учествују у синтези протеина. Међутим, информације о синтези протеина садржане су само у мРНА.

Нуклеотиди - главна понавља јединица у молекулима нуклеинске киселине, хемијска једињења азотна база продуцт, пет угљеник шећера а (пентозни) и једног или више фосфатне групе. Нуклеотиди присутни у нуклеинским киселинама садрже једну фосфатну групу. Они су позвали садрже азотна база - аденин (А), која садржи аденин, гуанин (Г) - гуанин, цитозин (Ц) - цитозин, тимин (Т) - тимин, урацил (У) - урацил. Композиција укључује 4 типа ДНК нуклеотид - А, Т, Г, Ц, типа РНК добро 4 - А, У, Г, Ц. Сугар састављена од свих ДНК је Дезоксирибоза нуклеотида, РНК - рибоза. У формирању нуклеинских киселина, нуклеотида, путем везивања за формирање шећера-фосфат окосницу молекула, са једне стране од којих су базу.

Пример - катабатна ДНК која се користи за репликацију матричног ланца. Сваки од прајмера је комплементаран једној од праменова двоструке матрице, уоквирујући почетак и крај амплификованог региона.


Повезани Чланци Хепатитис